La purificación de ADN requiere un método compatible con el tipo de muestra, el volumen disponible y la aplicación posterior. Un rendimiento de extracción fiable es esencial para aplicaciones posteriores, como la amplificación por PCR, los estudios de genotipado y la tipificación HLA.
La purificación de ADN genómico a partir de tejidos y muestras biológicas heterogéneas requiere una disrupción celular eficaz y la eliminación de proteínas, lípidos y otros componentes inhibidores. La elección de un sistema adecuado permite obtener ADN suficientemente puro e íntegro para reacciones enzimáticas y análisis moleculares.
Características de SpeedTools DNA Extraction Kit
SpeedTools DNA extraction kit es más rápido y fácil que los protocolos tradicionales que usan gradientes de densidad y/o solventes orgánicos peligrosos.
El kit emplea un tampón de lisis especialmente formulado y una membrana de silica de alta resolución insertada en las columnas.
Con SpeedTools DNA Extraction kit, se puede extraer y purificar ADN genómico de:
- células en cultivo;
- sangre total;
- suero;
- capa leucoplaquetaria;
- plasma;
- otros fluidos corporales.
La sangre total debe estar tratada con EDTA, citrato o heparina.
El ADN obtenido está listo para usarse en reacciones tales como PCR, transferencia de Southern o cualquier otro tipo de reacción enzimática.
Purificación mediante columnas de sílice
Magen ofrece sistemas de extracción de ADN de tejidos y muestras diversas basados tanto en columnas de centrifugación con membrana de sílice como en plataformas de purificación con partículas magnéticas.
Estos sistemas permiten purificar ADN a partir de una amplia variedad de muestras biológicas, como tejidos animales, células cultivadas, derivados sanguíneos y otros materiales de laboratorio.
Dentro de esta gama, el HiPure Universal DNA Kit (D3018) constituye la configuración de referencia basada en columnas para la purificación de ADN genómico a partir de diversas muestras biológicas.
HiPure Universal DNA Kit
El HiPure Universal DNA Kit (D3018) está orientado a la purificación de ADN genómico a partir de diversas muestras biológicas mediante un sistema de columnas.
| Característica | Descripción |
|---|---|
| Configuración | Columnas de centrifugación |
| Material de purificación | Membrana de sílice |
| Ámbito de uso | Diversas muestras biológicas |
| Producto | HiPure Universal DNA Kit (D3018) |
Purificación automatizada con partículas magnéticas
Para los laboratorios que utilizan plataformas de purificación automatizadas, el MagPure Universal DNA Kit (IVD3102) ofrece un flujo de trabajo con partículas magnéticas diseñado para sistemas de extracción automatizados.
Las plataformas basadas en partículas magnéticas pueden integrarse en flujos de trabajo automatizados y permiten procesar muestras con una intervención manual reducida.
MagPure Universal DNA Kit
El MagPure Universal DNA Kit (IVD3102) está diseñado para sistemas de extracción automatizados y utiliza partículas magnéticas como base del flujo de purificación.
| Característica | Descripción |
|---|---|
| Configuración | Plataforma automatizada |
| Tecnología | Partículas magnéticas |
| Aplicación | Purificación de ADN en sistemas de extracción automatizados |
| Producto | MagPure Universal DNA Kit (IVD3102) |
Purificación de ADN a partir de tejidos
Para la purificación rutinaria de ADN genómico a partir de muestras de tejido, también puede utilizarse el HiPure Tissue DNA Kit (D3121).
La obtención de ADN a partir de tejidos exige una disrupción celular eficaz y la eliminación de proteínas, lípidos y otros componentes inhibidores.
El HiPure Tissue DNA Kit (D3121) está destinado a flujos de trabajo rutinarios de purificación de ADN genómico a partir de muestras de tejido.
Extracción de ADN en muestras forenses
Para los flujos de trabajo de ADN forense, se ofrecen sistemas de extracción especializados que favorecen la recuperación de ADN en indicios procedentes de materiales difíciles.
El HiPure Bone DNA Kit (D3124) y el MagPure Forensic DNA Kit (D6359D) están diseñados para purificar ADN genómico a partir de huesos, cabellos y otras muestras forenses que requieren una recuperación eficaz de material escaso o degradado.
| Producto | Aplicación |
|---|---|
| HiPure Bone DNA Kit (D3124) | Purificación de ADN genómico a partir de huesos y otras muestras forenses |
| MagPure Forensic DNA Kit (D6359D) | Purificación de ADN genómico a partir de huesos, cabellos y otras muestras forenses |
La selección entre columnas de centrifugación y partículas magnéticas depende de la configuración del laboratorio, del grado de automatización requerido y del tipo de muestra que se desea procesar.
ADN de saliva y muestras bucales
ISOHELIXXtremeDNA Kit for isolating purified DNA from saliva and buccal swab samples.
Este sistema utiliza una química optimizada de precipitación que garantiza la obtención de fragmentos de ADN de alto peso molecular y una pureza excepcional.
En la genómica actual, la calidad del material de partida determina el éxito del downstream processing.
A diferencia de los métodos de extracción estándar, XtremeDNA minimiza el cizallamiento del ADN, proporcionando plantillas de alta integridad incluso tras periodos de almacenamiento prolongados.
Estabilidad del ADN de saliva durante el almacenamiento
Se recogieron muestras de saliva de numerosos donantes, se mezclaron y, a continuación, se añadió a la saliva un volumen igual de conservante de ADN en hisopo de Norgen.
A continuación, la saliva conservada se almacenó a temperatura ambiente durante un máximo de 75 meses.
Posteriormente, se aisló ADN de saliva a la semana, a las 3 semanas, al mes, a los 2 meses, a los 4 meses, a los 6 meses, a los 8 meses, a los 12 meses, a los 20 meses, a los 32 meses, a los 40 meses, a los 52 meses y a los 75 meses a partir de 0,5 mL de la muestra de saliva/conservante utilizando el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (Cat. RU45400).
Para el análisis visual, se pasaron 100 µl del ADN purificado en un gel TAE de agarosa.
Como puede observarse, no hay indicios de degradación del ADN después de almacenar las muestras de saliva durante 75 meses a temperatura ambiente en el conservante de ADN para hisopos de Norgen.
Además, el tamaño del ADN se mantuvo por encima de 24 kb durante todo el periodo de 75 meses.
M: Escala de ADN UltraRanger 1 Kb de Norgen (Cat.
Evaluación mediante PCR en tiempo real
La calidad del ADN de saliva almacenado a temperatura ambiente no varió entre 1 semana y 75 meses, como indica el hecho de que los valores Ct se mantuvieron constantes.
La mejora en los valores Ct del gráfico de PCR en tiempo real también indica el impacto del método mejorado de aislamiento de ADN de saliva proporcionado por el kit de aislamiento de ADN de saliva (Cat.
Todas las muestras de ADN de saliva aisladas se amplificaron con éxito sin ningún signo de inhibición de la PCR.
Azul: ADN de saliva aislado utilizando el kit mejorado de aislamiento de ADN de saliva (Cat. RU45400).
La estabilidad del material conservado permite utilizar muestras almacenadas a temperatura ambiente durante periodos prolongados, siempre que se empleen las condiciones y los productos de conservación correspondientes.
Análisis metagenómico de muestras de saliva
El ADN de saliva se aisló utilizando el kit de aislamiento de ADN de saliva de Norgen (Cat. RU45400) a partir de saliva conservada durante distintos periodos de tiempo, hasta 6 años, a temperatura ambiente.
Datos metagenómicos de MiSeq 16s ARNr de Illumina de muestras de saliva conservadas durante más de 6 años con el conservante de ADN para hisopos de Norgen.
Análisis de coordenadas principales de 12 microbiomas de saliva que muestran diferencias en la distribución de las clasificaciones taxonómicas entre las muestras hasta el nivel de reino.
Taller 'Extrae tu propio ADN'
Cuando se almacenan a temperatura ambiente, los tubos conservantes de hisopos de Norgen no utilizados son estables hasta la fecha de caducidad sin que se reduzca su rendimiento.
Extracción secuencial de proteínas, ADN y ARN
The Sequential Protein/DNA/RNA Extraction Kit represents an exceptional multi-omics solution designed for the sequential purification of high-quality protein, DNA, and RNA from the same cell or tissue sample.
The Kit contains 2 vials of magnetic beads and the 10 buffers/solutions required to extract the protein, DNA and RNA from the sample.
Store the Dynabeads Sequential Protein Binding Beads and the Sequential Protein Elution Buffer at 2°C to 8°C.
Este enfoque permite obtener proteína, ADN y ARN de una misma muestra celular o tisular mediante una solución multiómica de purificación secuencial.
Purificación de productos de PCR y fragmentos de ADN
Diseñado para la purificación y concentración rápidas de productos de PCR o fragmentos de ADN con un tamaño de 50 bp a 10 kb.
| Material | Tamaño indicado | Objetivo |
|---|---|---|
| Productos de PCR | 50 bp a 10 kb | Purificación y concentración rápidas |
| Fragmentos de ADN | 50 bp a 10 kb | Purificación y concentración rápidas |
Exosomas y células tumorales circulantes
Exosomas y CTCSoluciones especializadas para el aislamiento de exosomas y CTC que estabilizan la señal de interés.
Los exosomas y las células tumorales circulantes (CTC) son componentes de las biopsias líquidas con un gran potencial.
Sin embargo, su adopción generalizada se ha visto dificultada por la falta general de soluciones estandarizadas y robustas de preparación de muestras para la purificación de exosomas y el aislamiento de CTC.
El procesamiento estandarizado de muestras para la purificación de exosomas y CTC es un factor crucial en las investigaciones con biopsias líquidas.
Nuestras soluciones especializadas para el aislamiento de vesículas extracelulares (VE) y CTC reducen el fondo y estabiliza la señal de interés.
La diversidad de sistemas de extracción permite adaptar la purificación a muestras de sangre, tejidos, saliva, células cultivadas, indicios forenses, productos de PCR y muestras destinadas a estudios multiómicos.
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